Na determinação da demanda bioquímica de oxigênio (DBO₅) a amostra de água é incubada em condições específicas por um período de 5 dias. O teor de oxigênio na amostra é determinado em dois momentos: antes da incubação, oxigênio dissolvido inicial (OD₀) e após a incubação, oxigênio dissolvido final (OD₅).
As determinações de OD₀ e de OD₅ podem ser feitas pelo método Winkler, um método titulométrico. Esse método baseia-se nas reações representadas nas equações a seguir.

2Mn²⁺(aq) + 4OH⁻ (aq) + O₂ (aq) → 2MnO(OH)₂ (s)
2MnO(OH)₂ (s) + 2I⁻ (aq) + 4H⁺(aq) → Mn²⁺ (aq) + I₂ (aq) + 3H₂ O (l)
I₂ (aq) + 2S₂ O₃ ²⁻(aq) → 2I⁻(aq) + S₄ O₆ ²⁻(aq)

No método Winkler, o agente titulante é uma solução padrão de e o indicador é . As lacunas são preenchidas, correta e respectivamente, por