Alguns testes de inibição do crescimento bacteriano podem apresentar resultados falso-negativos, surgindo zonas de inibição similares às causadas pela presença de penicilina, quando se utilizam amostras de leite oriundas de vacas com mastite.

O teste de inibição do crescimento bacteriano baseia-se na incubação de um microrganismo conhecido (geralmente Staphylococcus aureus) com uma amostra de leite, e a inibição pode ser observada através da formação de um halo de inibição, no caso do método de disco em placas.

Os testes de inibição do crescimento bacteriano que utilizam o bromocresol púrpura, um indicador de pH, oferecem menor ocorrência de resultados falso-negativos, pois, quando ocorre multiplicação bacteriana, há produção de ácido, mudando a cor do indicador de púrpura para amarelo.

No teste de inibição do crescimento bacteriano, uma amostra de leite é incubada por várias horas com uma amostra de um microrganismo conhecido (geralmente Bacillus stearothermophilus) e, caso haja uma concentração de antibióticos suficiente, o crescimento bacteriano será reduzido ou impedido.

Alguns testes de inibição do crescimento bacteriano podem apresentar resultados falso-negativos, quando utilizadas amostras de leite com elevadas concentrações de lactoferrina, lisozima e complemento, condições frequentemente encontradas no final da lactação.