As metodologias utilizadas para realização do Teste de Esterilidade são a adição direta e a filtração em membrana.

A metodologia de filtração do produto através de membranas esterilizantes (poros de 0,22 µm ou 0,45 µm) retém os microrganismos presentes na amostra, é altamente sensível, e deve ser utilizada sempre que possível.

os meios de culturas básicos recomendados para o Teste de Esterilidade são o Meio Fluido de Tioglicolato para detecção de bactérias e Caldo Caseína Soja para detecção de fungos e leveduras.

os meios de culturas utilizados no Teste deEsterilidade devem ser incubados a 32 +/-2,5ºC para detecção de bactérias e 22,5 +/- 2,5ºC para detecção de fungos e leveduras.

em caso de crescimento microbiano, quando se utiliza a técnica de membrana filtrante, um novo teste pela técnica de adição direta é recomendado.