O método Sanger de sequenciamento de DNA representa um marco fundamental na história da biologia molecular pelo cientista Frederick Sanger por sua habilidade de entender e manipular os processos bioquímicos que ocorrem durante a síntese de DNA. Tal desenvolvimento foi reconhecido como vencedor do Prêmio Nobel em 1980.

Sobre o princípio da técnica de Sanger, assinale a alternativa correta.

A

Cada didesoxinucleotídeo trifosfatado (ddNTP) utilizado na reação de sequenciamento de Sanger irá promover o término da reação de amplificação por interromper a formação da ligação fosfodiéster.

B

A reação de sequenciamento de Sanger é realizada pela DNA polimerase que requer uma fita de oligonucleotídeo iniciador (primer), na qual são adicionados desoxinucleotídeos trifosfatados (dNTP) ao grupo 5’ - hidroxila do primer.

C

Para que ocorra a reação de sequenciamento pelo método de Sanger são necessários desoxinucleotídeos trifosfatados (dNTPs), DNA polimerase, fita molde de DNA e um par de primers, sendo que cada primer reconhece uma das fitas de DNA que serão copiadas nas reações de amplificação de DNA.

D

O método de sequenciamento de Sanger requer a presença dos quatro desoxinucleotídeos trifosfatados (dNTPs), didesoxinucleotídeos trifosfatados (ddNTPs), além do par de primers, RNA polimerase e enzima transcriptase reversa.

E

No método de Sanger, a sequência de DNA é lida pela determinação de cores à medida que cada fluoróforo ligado aos desoxinucleotídeos trifosfatados (dNTPs) é reconhecido pelo detector que está acoplado a um sistema de computador.

Provas

Questão presente nas seguintes provas

3488815 Ano: 2024
Disciplina: Biologia
Banca: VUNESP
Orgão: UNICAMP

Provas:

Biologista
Provas ×

Considerando o esquema dos nucleotídeos de adenina representados a seguir, identifique quais são os nucleotídeos que poderiam ser utilizados no método de sequenciamento de Sanger, e a seguir, assinale a alternativa correta.

Enunciado 4043310-1

Provas

Questão presente nas seguintes provas

3488814 Ano: 2024
Disciplina: Biologia
Banca: VUNESP
Orgão: UNICAMP

Provas:

Biologista
Provas ×

Avalie as afirmações a seguir sobre técnicas de sequenciamento do DNA, e, a seguir, assinale a alternativa correta.

A

O sequenciamento de DNA de amostras biológicas obtidas de fósseis e restos arqueológicos é impreciso devido à degradação e contaminação do DNA ao longo do tempo, sendo impraticável pelo fato de gerar resultados não satisfatórios.

B

Atualmente o estado da arte sobre o tema sequenciamento de genomas inteiros ainda é um processo de baixo rendimento e pouco preciso, o que tem prejudicado estudos populacionais para explorar a diversidade genética.

C

A semelhança do genoma humano não permite que o sequenciamento de DNA de amostras de populações ancestrais forneça informações sobre a história humana.

D

O princípio da técnica do sequenciamento Sanger não contribuiu para o desenvolvimento de técnicas de sequenciamento de próxima geração (NGS), visto que se utilizam de princípios bastante distintos.

E

A descoberta da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) trouxe enormes benefícios para o desenvolvimento das técnicas de sequenciamento de genomas.

Provas

Questão presente nas seguintes provas

3488813 Ano: 2024
Disciplina: Biologia
Banca: VUNESP
Orgão: UNICAMP

Provas:

Biologista
Provas ×

A temperatura de anelamento (Tm) é calculada para

Provas

Questão presente nas seguintes provas

3488812 Ano: 2024
Disciplina: Biologia
Banca: VUNESP
Orgão: UNICAMP

Provas:

Biologista
Provas ×

Para aumentar a especificidade dos primers desenhados para PCR evitando a formação de dímeros de primers e ligações inespecíficas, é recomendável o seguinte:

Provas

Questão presente nas seguintes provas

3488811 Ano: 2024
Disciplina: Biologia
Banca: VUNESP
Orgão: UNICAMP

Provas:

Biologista
Provas ×

Para o desenho de primers utilizados em PCR, é importante considerar que

Provas

Questão presente nas seguintes provas

3488810 Ano: 2024
Disciplina: Biologia
Banca: VUNESP
Orgão: UNICAMP

Provas:

Biologista
Provas ×

A quantificação precisa de DNA e RNA é essencial em biologia molecular, genética, biotecnologia e diagnóstico clínico. Existem vários métodos para quantificar ácidos nucleicos, cada um com suas vantagens, desvantagens e aplicações específicas. Com relação aos métodos de análise e quantificação de ácidos nucleicos, assinale a alternativa correta.

A

A determinação da concentração precisa de ácidos nucleicos pode ser realizada pela absorção de luz em determinada faixa de comprimento de onda, geralmente 260 nm para proteína e 280 nm para DNA e RNA.

B

O equipamento Nanodrop é um espectrofotômetro desenvolvido para determinar a concentração de DNA fita dupla, a partir de pequenas quantidades de solução 1 a 2 μL, porém não detecta DNA fita simples ou RNA.

C

Quando a razão da absorbância 260/280 nm de uma solução de DNA obtida no Nanodrop estiver abaixo de 1,8 indica contaminação da amostra com proteínas ou outros contaminantes que absorvem próximo de 280 nm.

D

Os fluorômetros como Qubit detectam corantes fluorescentes ligados especificamente à molécula de DNA dupla fita em quantidades extremamente pequenas, mas não servem para quantificar RNA ou proteínas.

E

A eletroforese em gel representa um método de análise quantitativa de DNA e RNA, sendo a quantidade precisa de ácido nucleico estimada comparando com a intensidade de bandas com padrões conhecidos.

Provas

Questão presente nas seguintes provas

3488809 Ano: 2024
Disciplina: Biologia
Banca: VUNESP
Orgão: UNICAMP

Provas:

Biologista
Provas ×

Considerando métodos para extração e purificação de ácidos nucleicos, assinale a alternativa correta.

A

Beads magnéticas revestidas com material que se liga ao RNA ou DNA são usadas para purificação fácil e com alta pureza, entretanto, o custo é relativamente alto e necessita de equipamento específico.

B

A escolha do método de extração independe do tipo de amostra, da quantidade de DNA ou RNA obtida para ensaios subsequentes, pois são métodos padronizados e que apresentam igual eficácia.

C

O método de extração com fenol-clorofórmio é amplamente usado em muitos laboratórios devido sua eficácia, porém, apresentam alto custo quando comparados com outros métodos de extração.

D

Os métodos que utilizam kits comerciais baseados em colunas de sílica são simples e rápidos, porém, apresentam alto teor de contaminantes, após eluição dos ácidos nucleicos com tampão de baixa salinidade.

E

Colunas de gel filtração de fase reversa são ideais para a extração de DNA e RNA de amostras biológicas, pois apresentam alto grau de purificação, rendimento e baixo custo comparativamente aos demais métodos.