A fim de compreender os mecanismos genéticos associados à altura e ao alongamento do caule em uma determinada população de Arabidopsis thaliana adaptada a temperaturas mais elevadas, pesquisadores estão estudando o papel do gene AtGA20ox1, utilizando o sistema CRISPR-Cas9. Durante o planejamento do desenho experimental, os pesquisadores observaram a necessidade da presença de uma pequena sequência adjacente ao alvo, denominada protospacer adjacent motif (PAM). No contexto do CRISPR-Cas9, assinale a alternativa correta sobre a sequência PAM.

Durante um estudo sobre respostas ao estresse hídrico em uma espécie de milho, uma pesquisadora utilizou RNA de interferência (RNAi) para reduzir a expressão do gene ZmDREB2A, um importante regulador transcricional envolvido na resposta fisiológica ao estresse hídrico. Nesse contexto experimental, o uso de scrambled siRNA é essencial porque

Durante a clonagem molecular de um gene de interesse em Escherichia coli, uma pesquisadora preparou células competentes utilizando solução de cloreto de cálcio (CaCl₂) e realizou o processo de transformação por choque térmico, seguido de plaqueamento em meio LB contendo antibiótico. Após incubação, foram observadas colônias em crescimento apenas nas placas contendo o plasmídeo. Considerando os princípios físico-químicos e biológicos envolvidos nessa técnica, é correto afirmar que:

Sobre as tecnologias de sequenciamento de nova geração (NGS), analise as assertivas abaixo e assinale V, se verdadeiras, ou F, se falsas.

( ) As plataformas Illumina e Ion S5 são exemplos de sequenciamento de nova geração, mas se diferenciam no método de detecção da incorporação de nucleotídeos: a plataforma Illumina utiliza fluorescência e o Ion S5 utiliza mudanças de pH.

( ) O sequenciamento de long reads é ideal para a montagem de genomas de novo, pois a capacidade de ler fragmentos de dezenas a centenas de milhares de pares de bases ajuda a resolver regiões complexas e repetitivas.

( ) A reação em cadeia da polimerase é um passo obrigatório para todas as tecnologias de NGS, pois é a única maneira de amplificar o material genético e garantir que haja DNA suficiente para a análise.

( ) O demultiplexing é uma etapa da análise secundária, em que as leituras de cada amostra são separadas em arquivos individuais, o que é fundamental para a análise subsequente.

A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:

A eficiência da eletroporação é altamente dependente das propriedades físicas da membrana celular. Em uma comparação entre a transformação de fibroblastos e células dendríticas, observa-se que os fibroblastos são geralmente mais facilmente transfectados. Qual característica intrínseca da membrana plasmática dos fibroblastos é a principal responsável por essa diferença?

Durante um estudo sobre onças-pintadas provenientes de diferentes biomas brasileiros, pesquisadoras realizaram análises genéticas utilizando o sequenciamento de Sanger, com foco no gene Mc1r (receptor de melanocortina 1), envolvido na regulação da coloração da pelagem. O objetivo foi investigar variantes associadas ao melanismo, uma característica adaptativa rara em algumas populações. Ao analisar os dados do eletroferograma, foram observados picos duplos bem definidos em determinadas posições da sequência, sem ruído de fundo ou artefatos instrumentais. Esse resultado sugere

O preparo de bibliotecas genômicas é uma etapa fundamental para o sucesso do sequenciamento, seja ele voltado à análise genômica, transcriptômica ou metagenômica. Cada tipo de amostra requer protocolos específicos de fragmentação, purificação e ligação de adaptadores. A compreensão das diferenças entre esses procedimentos é essencial para interpretar os resultados de experimentos de RNA-seq, metagenômica e NGS em geral. Analise as assertivas abaixo sobre diferentes estratégias empregadas na construção de bibliotecas de DNA e RNA, assinalando V, se verdadeiras, ou F, se falsas.

( ) Na construção de bibliotecas metagenômicas, o DNA obtido de múltiplas espécies precisa ser fragmentado aleatoriamente.

( ) Durante o preparo de bibliotecas de cDNA para RNA-seq, a fragmentação enzimática permite o controle mais preciso do tamanho médio dos fragmentos.

( ) A vantagem de construir uma biblioteca de DNA de fita dupla garante a cobertura de DNA mitocondrial.

( ) Durante a conversão de RNA em cDNA, o uso de transcriptase reversa é fundamental para promover a ligação covalente entre adaptadores e RNA.

( ) Durante o preparo de bibliotecas de RNA-seq, o uso de oligo(dT) serve para selecionar RNA mensageiro por hibridização à cauda poli(A).


A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:

Durante a verificação da pureza de amostras de DNA extraídas de folhas de milho, uma pesquisadora decidiu analisar os fragmentos em gel de agarose antes de prosseguir para o sequenciamento. Para garantir a visualização das bandas, adicionou brometo de etídio (EtBr) ao gel, um composto amplamente utilizado em laboratórios de biologia molecular. Com base nesse procedimento, assinale a alternativa correta sobre a função desse reagente na eletroforese.

Durante o planejamento de um experimento de RT-qPCR para avaliar a expressão do gene GAPDH em células humanas, uma pesquisadora observou que um dos pares de primers amplificava tanto o DNA genômico quanto o DNA complementar. Outro par de primers, no entanto, produzia um único produto e ausência de amplificação no controle sem transcriptase reversa (-RT). Conforme os princípios empregados para o desenho de primers para amplificação de DNA complementar, assinale a alternativa correta.

Em uma reação de PCR em tempo real utilizando o sistema com SYBR Green, a análise da curva de dissociação é importante porque