O primeiro passo em eletroforese bidimensional de gel separa proteínas por focalização isoelétrica. No segundo passo uma tira desse gel é colocada sobre outro gel que contém SDS e sobre ambos é aplicada corrente elétrica. No segundo passo:

Em uma focalização isoelétrica, a eritropoietina humana pode ser diferenciada de seus análogos eritropoietina recombinante e darbepoietina alpha. Essas proteínas são reveladas pela técnica de duplo blotting. Na técnica de duplo blotting a:

A diferença entre os valores de pI de proteínas pode ser utilizada para separá-las, submetendoas à migração eletroforética em um gradiente de pH imobilizado, técnica denominada focalização isoelétrica. Considerando o pI das proteínas

Indique a ordem em que se encontrariam as proteinas citadas a seguir se em um gradiente de pH imobilizado de 4-10, começando pelo pH 4:

O ponto isoelétrico, ou pI, é o valor de pH em que uma molécula apresenta carga elétrica líquida igual a zero. Dados os pIs teóricos, a proteína que estará mais protonada em pH 7 é:

Diversos fatores influenciam a velocidade de uma reação química. Dentre as opções abaixo, o fator que pode acelerar a velocidade da reação é:

Selecione a opção que contém as etapas necessárias para execução do protocolo de western blotting.

Em uma eletroforese de SDS-PAGE, uma amostra complexa de proteínas foi corrida em gel de poliacrilamida 10% a 150 V por 1 hora. Após a corrida, diversas bandas foram visualizadas por coloração com Coomassie blue. As bandas visualizadas no gel correspondem a proteínas que migraram majoritariamente de acordo com a seguinte propriedade físico-química:

Anticorpos ou imunoglobulinas são produzidos em células B e usados pelo sistema imune para reconhecimento e neutralização de agentes estranhos ao organismo como vírus e bactérias. Os anticorpos são:

O reagente Tris, tris(hidroximetil)aminometano, (HOCH2)3CNH2, massa molecular 121,12 g/mol, pKa = 8.1, é frequentemente usado como um componente de soluções tampão. A massa em gramas de Tris que deve ser adicionada a 2 L de água para fazer uma solução de 50 mM de Tris é:

Identifique adiante, a característica estrutural das proteínas que permite a reação química com o reagente de Biureto (solução alcalina de CuSO4).