As etapas de desidratação, clarificação ou diafanização e a impregnação ou infiltração em parafina irão propiciar a saída de água dos tecidos e a entrada de outros líquidos que sejam afins com a parafina que será impregnada na etapa subsequente (Michalany, 1990) e possa formar o bloco, o qual será submetido à microtomia. Diante destas informações analise as asserções a seguir:

I- No processamento histológico de rotina, o toluol é o mais utilizado na técnica da diafanização e, conforme vai penetrando na peça, em substituição ao material adquirido na desidratação, a peça vai se tornando mais clara, motivo pelo qual a etapa pode também ser chamada de clarificação.

II- A técnica da diafanização preconiza que o volume do reagente diafanizador deva imergir totalmente a peça. Os reagentes utilizados são insolúveis em água e solúveis em álcool. Aconselha-se que o recipiente com o volume do reagente esteja constantemente agitado para melhorar a difusão, com a saída do álcool e a entrada do reagente. Aconselha-se, também, a troca do reagente pelo menos duas vezes e não deixar a peça por muito tempo mergulhada para evitar ressecamento e prejudicar a qualidade da peça tecidual.

III- A técnica da impregnação permite a entrada de substâncias de consistência amolecida em toda a totalidade da peça, com o objetivo de adquirirem o envolvimento completo da peça e, por consequência, a rigidez ocupando os espaços anteriormente preenchidos por água e gordura, e que após um tempo, formam o bloco.

IV- As peças impregnadas são colocadas com a superfície a ser secionada voltada para baixo em um molde, normalmente metálico, preenchido com parafina líquida. Órgãos tubulares deverão ser incluídos no plano transversal, enquanto fragmentos de tecidos longos serão dispostos longitudinalmente. Tais orientações podem variar de acordo com o objetivo da pesquisa e o que se desejará observar posteriormente.

V- A microtomia promove a secção de uma fina camada de tecido, com uma espessura de 4 a 6 micrômetros, que é a espessura ideal para a passagem de luz e evidenciação dos componentes celulares dos tecidos.

É CORRETO o que se afirma em: