Estimativa da relação direta entre ingestão, tamanho do pool corporal e ocorrência de sinais de deficiência.

Extrapolação de dados de estudos epidemiológicos e experimentais em animais, dentro de estreitos limites.

Estudos de balanço, que, medindo a ingestão e a excreção de um determinado nutriente e calculando a diferença, obtêm uma estimativa de ganho ou perda pelo organismo.

Mudanças na excreção de ar alveolar expirado do nutrientes ou de um de seus metabólitos em resposta a mudanças na ingestão do nutriente.