O ferro é um micronutriente para os seres vivos, participando de uma série de processos bioquímicos dentro dos organismos vivos. O estado de oxidação em que se encontra exerce importância fundamental nesses processos, o que torna imprescindível a diferenciação entre as concentrações de Fe²⁺ e Fe³⁺ encontradas em solução, cujo procedimento analítico é denominado análise de especiação.

A fim de realizar a determinação das concentrações de Fe²⁺ e Fe³⁺ em uma amostra de água de poço, um analista químico explorou a reação entre o íon Fe²⁺ e o complexante orgânico 1,10-fenantrolina (C₁₂H₈N₂), em pH 4,5, para formação de um complexo de cor alaranjada, com máximo de absorção em 510 nm. Nessas condições, o íon Fe³⁺ não reage com a 1,10-fenantrolina. Na reação entre Fe²⁺ e a 1,10-fenantrolina, apresentada abaixo, X representa a 1,10-fenantrolina e [FeX₃]²⁺, o complexo formado.

Fe²⁺ + 3X !$ \rightleftharpoons !$ [FeX₃]²⁺

O procedimento experimental adotado envolveu a construção de uma curva analítica, a partir de soluções padrões de Fe a 510 nm, com cubetas de 1,0 cm, cuja equação foi A = 0,50 C _{(mg Fe/L)} + 0,0001; R² = 0,9998.

As soluções oriundas da amostra foram preparadas a partir de alíquotas de 25,00 mL, acrescidas ou não de soluções tampão, ácido ascórbico a 2%, X a 1% e água deionizada até o traço de aferição do balão de 50,00 mL. Os volumes e as respectivas absorvâncias, nas mesmas condições espectrofotométricas, estão discriminadas na tabela abaixo.

Considerando-se que o ácido ascórbico, nas condições de medida, é capaz de reduzir todo o Fe³⁺ a Fe²⁺, as concentrações dessas espécies na água de poço original são, em mg/L, respectivamente,