Para o diagnóstico de AHAI, devem ser realizados os seguintes exames: hemograma, contagem de reticulócitos, testes para comprovação de hemólise (LDH, bilirrubinas, haptoglobina), teste da antiglobulina direto, identificação do anticorpo ligado à superfície das hemácias (teste da antiglobulina direto monoespecífico) e pesquisa de crioaglutininas.

Na AHAI a frio, os autoanticorpos “frios” se ligam aos eritrócitos em temperaturas entre 4-18 °C, podendo levar à aglutinação de eritrócitos na circulação sanguínea, e a hemólise ocorre ao ser ativado o sistema complemento.

Um dos tipos de AHAI a frio é a doença das aglutininas a frio (crioaglutininas), que em geral é causada por uma IgG bifásica e apresenta boa resposta ao tratamento de primeira linha com corticoide ou de segunda linha com esplenectomia.

Na AHAI a quente, os autoanticorpos “quentes” reagem mais fortemente à temperatura corporal (37 °C), sendo em geral incapazes de aglutinar as hemácias, e a hemólise ocorre pela destruição pelo sistema reticuloendotelial.

Na AHAI a quente, os anticorpos que reagem à temperatura corporal são quase sempre IgG, raramente IgM ou IgA. Os anticorpos “quentes” são responsáveis por cerca de 70% a 80% de todos os casos de AHAI, que pode ocorrer em qualquer idade, sendo mais comum em mulheres adultas.