Antes das plataformas de sequenciamento de nova geração, um genoma era sequenciado de duas formas: ou por bibliotecas genômicas ou por bibliotecas de EST. Dentre as várias etapas que fazem parte do processo de montagem de uma biblioteca genômica, dez são citadas a seguir.

1. Isolamento do DNA de interesse;

2. Seleção dos transcritos usando coluna de oligo dT;

3. Obtenção do cDNA usando uma transcriptase reversa;

4. Tratamento do DNA com uma enzima de restrição;

5. Clonagem dos insertos em vetores de expressão;

6. Seleção dos clones transformantes que confirmam a presença do inserto no vetor de clonagem;

7. Amplificação dos cDNAs por técnica de PCR;

8. Montagem da biblioteca de transformantes positivos para a clonagem do inserto em placas de 96 poços;

9. Armazenamento das placas da biblioteca em temperatura próxima a - 80ºC;

10. Sequenciamento do inserto fazendo uso de oligonucleotídeos que ancoram nas pontas do vetor, estando direcionados para o interior do inserto.

A somatória das afirmações que fazem parte da construção de uma biblioteca genômica é de: