Questão 1148327

1148327 Ano: 2016
Disciplina: Biologia
Banca: IADES
Orgão: PC-DF

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Perito Criminal - Biologia
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Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta.

Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades.

Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5’ de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar.

Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores.

Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3’-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase.

O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração.

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