Atualmente, a PCR em Tempo Real é uma das técnicas mais utilizadas para diferentes diagnósticos e exames como: identifcação de agentes infecciosos, alterações dos cromossomos, determinação de paternidade, genealogia, identificação de pessoas ou amostras, síndromes genéticas, propensão a doenças (testes prediϴ vos) etc. Sobre esta técnica para a fi nalidade diagnóstica é INCORRETO afirmar que:

Em sistemas onde se usa a referência passiva, para uniformizar e normalizar a absorção da fluorescência em toda a placa, o filtro D (≈610 nm) não fica disponível para a reação multiplex. É correto afirmar que:

Diferentes sistemas e fluorescências podem ser utilizados para a técnica de PCR em Tempo Real. Historicamente, o PCR em Tempo Real vem evoluindo em relação a quantidade de filtros e, consequentemente, capacidade de multiplexação de alvos. Neste senϴ do, um pesquisador pretende desenvolver um ensaio pentaplex, sem referência passiva, para diferenciar diferentes patógenos. Visando um ensaio diagnóstico com alta sensibilidade e especificidade, a combinação de fluoróforos viável em relação ao espectro de fluorescência de um equipamento de PCR em tempo Real de 6 canais. É correto afirmar que:

A técnica de amplificação em cadeia da polimerase (PCR) é composta por três etapas: desnaturação da dupla fita de DNA, anelamento dos oligonucleoσ deos e extensão da cadeia. É correto afirmar que:

Durante as últimas décadas, o desenvolvimento de novos insumos e equipamentos permitiram a evolução da PCR convencional para um novo sistema que amplifica e detecta os produtos de PCR em Tempo Real, tornando esta técnica a mais utilizada no momento para o diagnóstico molecular. Sobre a PCR em Tempo Real, uma inovação tecnológica resultante da PCR convencional, é correto afi rmar que:

Para garantir o desempenho de um produto de diagnóstico molecular, se faz necessário o processamento de controles positivo, negativo e interno. Os controles minimizam possíveis erros técnicos, contaminações, resultados falso negativos e falso positivos, além de garantir uma avaliação do desempenho do produto. Caso um produto de diagnóstico molecular possua VLP (“Virus Like Particle”) como controle em sua composição, é correto afi rmar que:

A implementação do Teste de Amplificação de Ácidos Nucléicos (NAT) para triagem em bancos de sangue reduz o risco transfusional de agentes virais como HIV, HCV, HBV entre outros. É correto afirmar que:

As limitações dos métodos de sequenciamento de primeira geração levaram ao desenvolvimento de tecnologias de sequenciamento de nova geração, que são capazes de realizar sequenciamento paralelo massivo de DNA. O sequenciamento de segunda e de terceira geração são denominados:

O sequenciamento genético é uma técnica desenvolvida nos anos 70 e ganhou força em meados da década de 80 com o sequenciamento de Sanger. No entanto, foi com o surgimento do Sequenciamento de Nova Geração (NGS) que houve uma revolução na maneira de se realizar a análise do DNA. As metodologias de sequenciamento de DNA que são consideradas de nova geração:

A descoberta da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR – “Polymerase Chain Reaction”) em 1986 permitiu consolidar nas últimas duas décadas o desenvolvimento de novas linhas de pesquisa básica e aplicada na área de reativos para diagnóstico. Esta técnica permite, a partir de uma pequena quantidade de ácido nucleico, amplificar diversas vezes em escala exponencial a região alvo aumentando a quantidade de material a ser analisada viabilizando assim a detecção da presença ou ausência de vírus, bactérias ou qualquer sequência de interesse. Baseado na metodologia de PCR para o diagnóstico, a partir da detecção de retrovírus, para um ensaio mais sensível e específico é correto afi rmar que: