O vapor saturado sob pressão (autoclave) é o meio mais eficaz e confiável de esterilização de materiais e soluções de laboratório. Em relação aos procedimentos de esterilização é INCORRETO afirmar que:

Em laboratórios de pesquisa e desenvolvimento científico, é comum que sejam utilizadas concomitantemente diferentes culturas de linhagens de células eucarióticas. Desta forma, contaminações cruzadas entre diferentes linhagens podem ocorrer. O método indicado para determinar a presença desta contaminação é a:

Um dos agentes contaminantes que podem afetar as culturas de células eucarióticas são as bactérias do gênero micoplasma. Os micoplasmas são procariotos que não possuem parede celular recobrindo a sua membrana celular. Quanto à forma de detecção da presença dos micoplasmas nas culturas celulares, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas a seguir.

I – Testes moleculares, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), utilizando iniciadores específi cos para diferentes espécies de micoplasma, podem ser realizados rotineiramente, testando-se o meio de cultura das células.

II – Observação a olho nu, pois os meios de cultivo usados em culturas eucarióticas possuem marcadores colorimétricos que indicam a presença do contaminante.

III – Observação ao microscópio, sem a necessidade de corantes ou outros reagentes, pois a presença do micoplasma altera significativamente a morfologia de qualquer célula.

IV – Observação ao microscópio, sem a necessidade de corantes ou outros reagentes, pois o micoplasma é facilmente detectável por sua estrutura estafilocócica específica.

As afirmativas I, II, III E IV são, respectivamente:

Em um determinado laboratório são cultivados diferentes microrganismos, dentre eles, vírus, bactérias e parasitas. Os vírus, como microrganismos intracelulares obrigatórios, necessitam de células procarióticas ou eucarióticas para a sua replicação. Considere que se precisem realizar testes para padronizar uma cultura de células eucarióticas que serão usadas para a obtenção de um estoque de vírus zika. Para isso, dispõe-se de diferentes meios de cultivo celular que podem ser testados. O único meio de cultivo que NÃO é indicado para realizar os testes de padronização citado é:

Utilizando a câmara de Neubauer, determinou-se que a concentração presente em uma suspensão de células era de 3,75 x 10⁶ células/mL, em um volume total de 10 mL. Em seu laboratório, a concentração de células C6/36 (Aedes albopictus) recomendada é de 4,0 x 10⁴ células/ cm2. Foi solicitado que se preparasse uma placa de 6 poços, uma placa de 24 poços e a uma garrafa T75 com células C6/36. Com base nas informações anteriores e utilizando-se da tabela abaixo, a alternativa que corresponde ao volume de suspensão de células por poços e garrafa é:

A imagem abaixo representa uma câmara de Neubauer. Uma amostra de cultura de células em suspenção foi preparada para se determinar qual a concentração de células presentes na cultura. Para serem adicionadas à câmara, 100 μL de suspensão de células foi diluído com 900 μL de solução tampão. Dessa diluição, 10 μL foi novamente diluído em 10 μL de Azul de Trypan que, como marcador vital, cora o citoplasma das células mortas. A concentração de células viáveis presentes na amostra de cultura é:

No trabalho rotineiro de um laboratório de biologia celular existe a necessidade constante de manter um acervo das culturas de células. Contaminações, falhas de cultivo com consequente morte da cultura, instabilidade fenotípica, senescência são alguns dos motivos pelos quais a continuidade de uma cultura em uso poderá ser eliminada. Dessa forma, a criopreservação apresenta-se como uma solução de manutenção dos estoques das culturas, em que novas células podem ser recuperadas com base em uma cultura inicial. Nesse contexto, diferentes protocolos, que apresentam distintos índices de recuperação, viabilidade e preservação das culturas, podem ser utilizados. Assim, das soluções abaixo, a mais indicada para a criopreservação de células, com o foco na sua posterior recuperação, é:

O procedimento de repique é comumente realizado pelos laboratórios de cultivo celular para obtenção de subculturas e passagens. Para realizar este processo, diferentes métodos de dissociação de células aderentes podem ser utilizados, dependendo das suas características. O processo de dissociação das células pode ser realizado por: lavagem ou raspagem, como agentes mecânicos, ou a utilização de reagentes como a DNases, pronase, dispase e colagenase. Desses reagentes, a tripsina é uma das mais empregadas com esta finalidade. Quanto ao modo de ação, no processo de dissociação das culturas celulares, a tripsina é considerada um:

No que se refere às vias de transmissão dos vírus ao hospedeiro humano, correlacione as principais rotas de transmissão indicadas na coluna I com os vírus relacionados na coluna II:

Coluna I

1. sexual

2. vetorial

3. oral

Coluna II

( ) vírus da hepatite A

( ) vírus da febre amarela

( ) vírus da imunodefi ciência adquirida

( ) vírus chikungunya

( ) vírus do papiloma humano

A sequência correta, de cima para baixo, é:

Os vírus são microrganismo intracelulares obrigatórios que se utilizam das células vivas para manter o seu ciclo replicativo. O advento da propagação dos vírus em cultura de células no final da década de 40 propiciou um grande avanço no diagnóstico laboratorial das infecções virais. Os métodos de diagnóstico laboratorial de infecções virais podem ser subdivididos em dois grupos, conforme indicado na coluna I. Estabeleça a correta correspondência com os critérios da Coluna II.

Coluna I

1. Método de diagnóstico direto

2. Método de diagnóstico indireto

Coluna II

( ) baseia-se na identificação da presença do vírus ou dos seus componentes na amostra clínica

( ) reação de inibição da hemaglutinação

( ) isolamento viral

( ) titulação de vírus em cultura

( ) efeito citopático

A sequência correta, de cima para baixo, é: