Ao observar uma cultura celular ao microscópio óptico, um técnico fotografou a imagem representada a seguir.

Por meio dessa observação microscópica, o técnico considerou que a cultura analisada apresentava

Em uma cultura de células foram detectados os seguintes acontecimentos causados por um agente contaminante:

– competição com as células hospedeiras por nutrientes e precursores bioquímicos;

– fixação ou fusão com a membrana da célula hospedeira, causando danos à célula;

– interferência nos receptores da membrana, alterando mecanismos de transporte, sinalização e produção de citosinas;

– liberação de componentes do contaminante, causando ações degenerativas, levando à morte celular.

Um organismo capaz de realizar esses efeitos é um

A realização da análise microscópica é fundamental em estudos citológicos. Na rotina da microscopia são utilizadas as colorações que ajudam a identificar, com mais especificidade, estruturas microscópicas. Para esta finalidade, foram desenvolvidas, ao longo do tempo, inúmeras soluções de corantes e de misturas de corantes, que têm afinidade por componentes acidófilos ou basófilos da célula. Um exemplo de corante que tem afinidade por uma estrutura basófila em uma célula é

Na ilustração, verifica-se a atuação dos ingredientes de uma reação PCR que são a Taq polimerase, os primers, o DNA molde e os nucleotídeos. A ação dos primers e da Taq polimerase estão indicados, respectivamente, pelos números

O objetivo do PCR é fabricar quantidade suficiente da região de interesse do DNA, de modo que essa possa ser analisada e utilizada de acordo com foco da pesquisa. Nessa técnica, é necessário o uso de primers, após a desnaturação do DNA, processo este representado pelo número

Em análises citométricas, os protocolos de marcação intracelular são acompanhados de etapas de fixação. Para a fixação, são utilizados agentes que apresentam características importantes para a aplicação em citometria. Dessa forma, o fixador mais utilizado em citometria tem como seus principais alvos os grupos amino em aminoácidos de proteínas e nas bases de ácidos nucleicos, sendo também um bom fixador de lipídios que não altera os grupamentos funcionais de glicoproteínas de superfície celular. Trata-se de

Os métodos tradicionais para detecção de cistos de Giardia lamblia envolvem procedimentos para concentração e posterior visualização dos cistos por microscopia convencional, sendo, portanto, muito demorados. O uso de citometria de fluxo para essa finalidade é mais eficiente e rápido. Para isso, é feita a marcação das amostras com anticorpo monoclonal específico para o parasito e é utilizado Iodeto de Propídeo (PI). Esse teste possibilita a detecção do cisto do parasito nas amostras, como também a detecção da viabilidade das amostras, conforme ilustração a seguir.

A detecção pode ser realizada a partir de uma marcação com anticorpos monoclonais para moléculas de superfície desse parasito, e a avaliação da viabilidade, pode ser realizada com o marcador de morte celular representado por PI.

Os termos destacados estão indicados, respectivamente, pelos números da ilustração:

As análises por citometria feitas em um citômetro envolvem o sistema óptico que consiste em componentes de excitação e coleta. Esses componentes de excitação e coleta são representados, respectivamente, por

O sistema fluídico de um citômetro transporta as partículas (células humanas, por exemplo) a serem analisadas em um fluxo contínuo em direção ao ponto de interrogação do laser. Há, ainda, um outro fluido, geralmente uma solução tampão (sheath fluid), que envolve o núcleo onde passa a amostra na célula de fluxo. Na ilustração a seguir estão representadas as partes citadas.

Considerando as informações e a ilustração, sheat fluid, célula de fluxo, ponto de interrogação do laser e amostra são representados, respectivamente, pelos números

O sorting é um processo que tem aplicação de grande importância e destaque na citometria de fluxo e é realizado por citômetros específicos denominados Cell Sorters. O sorting tem uma ampla aplicação no estudo de culturas celulares, sendo uma de suas finalidades