Uma etapa muito importante de todos os procedimentos analíticos é o processo de calibração e padronização. A calibração determina a
relação entre a resposta analítica e a concentração do analito, que geralmente é realizada pelo uso de padrões químicos. Diversos tipos
de procedimentos de calibração podem ser utilizados como a comparação direta, a calibração com padrão externo, método de adição de
padrões e método do padrão interno.

I- Método I: neste método, uma quantidade conhecida da espécie que atua como referência é adicionada a todas as amostras,
padrões e brancos. Nele o sinal de resposta não é aquele do próprio analito, mas sim da razão entre o sinal do analito e o da espécie de referência. Na curva de calibração o eixo y é a razão entre as respostas e o eixo x é a concentração do analito nos padrões. Este método de calibração pode compensar certos tipos de erros se estes influenciam tanto o analito quanto a espécie de referência na mesma proporção.

II- Método II: Neste método de calibração, um padrão, contendo o analito em concentrações conhecidas, é preparado separadamente da amostra. Idealmente, três ou mais dessas soluções-padrão são usadas no processo de calibração. Esse tipo de método de calibração é utilizado para calibrar instrumentos e procedimentos quando não há efeitos de interferência de componentes da matriz na solução do analito. Uma curva de calibração é preparada colocando-se os dados em forma de gráfico ou ajustando-os por meio de uma equação matemática adequada.

III- Método III: Neste método de calibração uma propriedade do analito (ou o produto de uma reação com o analito) é comparada com um padrão, de maneira que a propriedade que está sendo avaliada se iguale com aquela do padrão. Alternativamente, uma comparação simples com vários padrões pode ser usada para indicar a concentração aproximada do analito.

IV- Método IV: Este método de calibração é utilizado quando é difícil ou impossível reproduzir uma cópia da matriz da amostra no
laboratório. Em geral, a amostra é “contaminada” com uma quantidade ou quantidades conhecidas de uma solução padrão
contendo o analito. Neste método, uma quantidade conhecida da solução padrão contendo o analito é adicionada a uma porção da
amostra. As respostas antes e depois da adição são medidas e posteriormente usadas para obter a concentração do analito.

Os conceitos acima se referem a: