Uma etapa muito importante de todos os procedimentos analíticos é o processo de calibração e padronização. A calibração determina a
relação entre a resposta analítica e a concentração do analito, que geralmente é realizada pelo uso de padrões químicos. Diversos tipos
de procedimentos de calibração podem ser utilizados como a comparação direta, a calibração com padrão externo, método de adição de
padrões e método do padrão interno.

I- Método I: neste método, uma quantidade conhecida da espécie que atua como referência é adicionada a todas as amostras,
padrões e brancos. Nele o sinal de resposta não é aquele do próprio analito, mas sim da razão entre o sinal do analito e o da espécie de referência. Na curva de calibração o eixo y é a razão entre as respostas e o eixo x é a concentração do analito nos padrões. Este método de calibração pode compensar certos tipos de erros se estes influenciam tanto o analito quanto a espécie de referência na mesma proporção.

II- Método II: Neste método de calibração, um padrão, contendo o analito em concentrações conhecidas, é preparado separadamente da amostra. Idealmente, três ou mais dessas soluções-padrão são usadas no processo de calibração. Esse tipo de método de calibração é utilizado para calibrar instrumentos e procedimentos quando não há efeitos de interferência de componentes da matriz na solução do analito. Uma curva de calibração é preparada colocando-se os dados em forma de gráfico ou ajustando-os por meio de uma equação matemática adequada.

III- Método III: Neste método de calibração uma propriedade do analito (ou o produto de uma reação com o analito) é comparada com um padrão, de maneira que a propriedade que está sendo avaliada se iguale com aquela do padrão. Alternativamente, uma comparação simples com vários padrões pode ser usada para indicar a concentração aproximada do analito.

IV- Método IV: Este método de calibração é utilizado quando é difícil ou impossível reproduzir uma cópia da matriz da amostra no
laboratório. Em geral, a amostra é “contaminada” com uma quantidade ou quantidades conhecidas de uma solução padrão
contendo o analito. Neste método, uma quantidade conhecida da solução padrão contendo o analito é adicionada a uma porção da
amostra. As respostas antes e depois da adição são medidas e posteriormente usadas para obter a concentração do analito.

Os conceitos acima se referem a:

A Figura abaixo mostra cromatogramas hipotéticos para uma mistura de seis componentes, constituída por três pares de componentes com ampla diferença de constantes de distribuição.

Fonte: SKOOG, WEST, HOLLER, CROUCH, Fundamentos de Química Analítica, Tradução da 9ª Edição norte-americana, Editora Thomson, São Paulo-SP, 2014.

Cada um dos cromatogramas utiliza condições cromatográficas específicas. No cromatograma (a), as condições foram ajustadas de forma que os fatores de retenção (k e k ) para os componentes 1 e 2 estejam na faixa ótima de 1 a 5. Contudo, os fatores para os outros 1 2 componentes estão longe do ótimo. De forma que as bandas correspondentes aos componentes 5 e 6 aparecem somente após um longo intervalo de tempo; além disso, as bandas são tão largas que torna difícil a sua identificação de forma inequívoca. No cromatograma (b), a variação das condições para se otimizar a separação dos componentes 5 e 6 aproxima os picos dos quatro primeiros componentes de forma que sua resolução não seja satisfatória. O fenômeno ilustrado é encontrado com frequência o suficiente para receber um nome de “o problema geral de eluição”. Em relação às afirmações abaixo, relativas aos cromatogramas apresentados, podemos concluir:

I- De forma individual, os três cromatogramas apresentados não são capazes de identificar, simultaneamente e de forma inequívoca, os seis componentes contidos na amostra.

II- Os cromatogramas “b” e “c” apresentam um tempo de eluição ideal, no entanto possuem uma baixa resolução para os componentes 5 e 6. Desse modo o correto seria utilizar o cromatograma “a”.

III- O cromatograma de melhor qualidade é o “c” pois consegue identificar de forma inequívoca todos os componentes da amostra em tempo adequado.

IV- Todos os cromatogramas apresentados possuem uma boa resolução e podem ser utilizados para identificar e quantificar todos os componentes da amostra.

Está CORRETO o que se afirma em:

Normalmente, a maneira mais fácil para melhorar a resolução de uma curva cromatográfica é otimizando-se o fator de retenção, k, pela
variação da composição do solvente, no caso de fases móveis líquidas. Um exemplo do efeito drástico que uma variação relativamente
simples na composição da fase móvel, composta pelos solventes metanol e água, pode ocasionar, está demonstrado na figura abaixo. O
cromatograma é relativo aos seguintes analitos (1) 9,10-antraquinona; (2) 2-metil-9,10-antraquinona; (3) 2-etil-9,10-antraquinona; (4)
1,4-dimetil-9,10-antraquinona; (5) 2-t-buti1-9,10-antraquinona.

Fonte: SKOOG, WEST, HOLLER, CROUCH, Fundamentos de Química Analítica, Tradução da 9ª Edição norte-americana, Editora Thomson, São Paulo-SP, 2014.

Diante do exposto, afirma-se:
( ) Apenas o cromatograma (d) mostra a separação adequada entre os picos relativos aos componentes das amostras.
( ) Os cromatogramas (a e b) são insatisfatórios em termos de resolução, já nos cromatogramas (c e d) observamos picos bem
separados para cada componente.
( ) Para a maioria dos casos, o cromatograma mostrado em (c) é o melhor, pois apresenta uma resolução adequada em um tempo
menor.
( ) Na figura, as variações na proporção entre metanol e água não melhoram a resolução dos cromatogramas.
( ) Diferentes porcentagens da mistura metanol: água promovem diferentes separações entre os picos cromatográficos.
Considerando V (verdadeiro) ou F (falso), assinale a alternativa que corresponde à sequência CORRETA:

Quando os métodos analíticos são aplicados a problemas do mundo real, a qualidade dos resultados, assim como a qualidade do desempenho das ferramentas e instrumentos usados, precisa ser constantemente avaliada. Analise os itens abaixo, quanto ao que contribui para a avaliação da qualidade dos resultados analíticos:

I- Controle de qualidade, validação dos resultados e a apresentação de resultados.

II- Desempenho do analista e qualidade do laboratório.

III- Modernidade dos equipamentos e vidrarias.

IV- Pureza dos reagentes utilizados, controle de qualidade e desempenho do analista.

V- Tipo de colunas utilizadas, pureza dos reagentes utilizados e validação dos resultados.

Está CORRETO o que se afirma apenas em:

Os procedimentos analíticos são caracterizados por inúmeras figuras de mérito, que são parâmetros que descrevem a qualidade de uma metodologia analítica, como por exemplo um método cromatográfico. Qual das alternativas abaixo descreve figuras de mérito usadas em cromatografia?

A preparação da fase móvel é de extrema importância para o sucesso de uma análise cromatográfica, de forma que podemos destacar
que as seguintes ações são importantes:
( ) Preparar a fase móvel diariamente.
( ) Estocar em recipientes plásticos
( ) Descrever a preparação em detalhes
( ) Medir o volume dos solventes antes de misturá-los
Considerando (V) verdadeiro e (F) falso, marque a sequência CORRETA:

As propriedades desejáveis para a fase líquida imobilizada em uma coluna cromatográfica gás-líquido incluem baixa volatilidade,
estabilidade térmica e inércia química. Já em relação à fase móvel neste tipo de cromatografia, podemos afirmar que
( ) não participam afetivamente da separação.
( ) são de fácil acesso e pouco onerosas.
( ) necessitam ser de alta pureza e compatíveis com o detector.
Considerando (V) verdadeiro e (F) falso, marque a sequência CORRETA:

O fator de retenção para cada soluto está relacionado à velocidade com a qual este soluto migra através da coluna. Pode ser considerado o intervalo de tempo que um soluto permanece na fase estacionária em relação ao tempo que este permanece na fase móvel. Como este fator de retenção pode ser variado nas cromatografias a gás e cromatografia de líquidos, respectivamente?

A Figura abaixo mostra os perfis de concentração para as bandas que contêm os solutos hipotéticos, A e B, em uma coluna no tempo t₁ e mais tarde no tempo t₂.

(Fonte: SKOOG, WEST, HOLLER, CROUCH, Fundamentos de Química Analítica, Tradução da 9ª Edição norte-americana, Editora Thomson, São Paulo-SP, 2014.)

Com base na figura acima e nos conceitos sobre alargamentos de bandas, foram feitas as seguintes afirmações:

I- O soluto B é mais fortemente retido pela fase estacionária que A.

II- A distância entre os dois picos aumenta à medida que eles se movem para baixo na coluna.

III- Ocorre um alargamento de ambas as bandas, diminuindo a eficiência da coluna como um dispositivo separador, à medida que os analitos se movem para baixo na coluna.

IV- O alargamento da banda é inevitável, no entanto as condições para que isso ocorra de forma mais lenta que a separação das bandas podem ser frequentemente determinadas.

V- Geralmente, uma separação total das espécies é possível se a coluna for suficientemente longa.

Está CORRETO o que se afirma em:

A figura abaixo mostra os ingleses A. J. P. Martin (A) e R. L. M. Synge (B), recebendo o Prêmio Nobel das mãos do Rei Gustavo VI Adolphus, da Suécia.

Fonte: Collins, C. H., Scientia Chromatographica, 2009, v.1, n.3, pag. 7-10.

O prêmio foi concedido a eles em 1952, por seu trabalho no desenvolvimento da cromatografia moderna. Nos seus estudos teóricos, eles adaptaram um modelo que foi originalmente desenvolvido nos anos 1920 para descrever as separações ou fracionamentos em colunas de destilação. Atualmente a cromatografia é um método de análise bastante utilizado em diversos ramos da indústria e pesquisa. Diante do exposto, analise as afirmações abaixo:

I- É uma técnica físico-química de separação de diversos analitos.

II- Utilizada individualmente, é capaz de quantificar quantidades da ordem de 10-12g.

III- Só pode ser utilizada para amostras líquidas.

Está CORRETO o que se afirma em: