Considere a genotipagem HLA por PCR-SSO, empregando a plataforma Luminex. Qual das alternativas abaixo NÃO está de acordo com essa tecnologia?

Assinale as afirmações abaixo, sobre técnicas de biologia molecular utilizadas para tipagem HLA, com V (verdadeiro) ou F (falso).

( ) A maioria dos métodos de sequenciamento (PCRSBT ou NGS) começam com uma etapa de PCR para aumentar a quantidade de DNA disponível para a reação posterior de sequenciamento.

( ) Na tipagem HLA por PCR-SSO (oligonucleotídeo sequência específica) reverso, o produto amplificado é adicionado a uma matriz sólida à qual as sondas (oligonucleotídeos) estão ligadas.

( ) Para verificar a inibição ou ausência de amplificação de uma reação de PCR-SSP, um controle interno polimórfico é adicionado a cada poço de reação.

( ) Uma das limitações da metodologia PCR-SSO reverso acontece quando o polimorfismo de determinado alelo encontra-se fora da região dos éxons amplificados, o que inviabiliza a identificação do alelo na amostra.

A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é

Considere uma avaliação pré-transplante, na qual a prova cruzada por citometria de fluxo foi positiva e a prova cruzada virtual foi negativa. Qual dos eventos apresentados nas alternativas abaixo pode explicar essa discordância?

Assinale as afirmativas abaixo, sobre prova cruzada contra linfócitos por citometria de fluxo, com V (verdadeiro) ou F (falso).

( ) Um resultado positivo indica que os anticorpos do soro do receptor se ligaram aos antígenos nas células-alvo, levando à morte celular por citotoxicidade dependente de complemento.

( ) Os anticorpos anti-HLA ligados às células do doador são detectados indiretamente por um anticorpo anti-IgG fluorescente.

( ) Dada a capacidade multiparamétrica da citometria de fluxo, é possível avaliar simultaneamente as células T e B.

( ) O resultado positivo em células T indica a presença de anticorpos anti-HLA de classe I exclusivamente, assim como o resultado positivo em células B indica a presença de anticorpos anti-HLA de classe II exclusivamente.

A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é

Considere as afirmativas abaixo quanto à quantificação de células-tronco progenitoras.

I - O método da plataforma dupla resulta em maior acurácia, já que a amostra é avaliada em dois aparelhos diferentes.

II - Preconiza-se o uso de um tampão de lise de eritrócitos livre de fixadores.

III - Pode-se utilizar o mesmo fluorocromo para a marcação dos anticorpos anti-CD34 e anti-CD45.

IV - O uso de um corante de viabilidade é crucial para o desfecho clínico, principalmente no caso de amostras criopreservadas.

Quais estão corretas?

Considere as afirmações abaixo sobre o HLA Matchmaker.

I - O algoritmo HLA Matchmaker é usado para a compatibilidade de epítopos HLA e anticorpos para o transplante de órgãos.

II - Avalia a antigenicidade e imunogenicidade dos epítopos HLA e sua relevância clínica na determinação de incompatibilidades (mismatches), HLA aceitáveis e permissíveis.

III - Os resíduos de aminoácidos (epítopos) que têm importância para a compatibilidade são os eplets. E, para que sejam imunogênicos e estimulem a formação de anticorpos, eles devem estar expostos e com raio de aproximadamente 3 angstron.

Quais estão corretas?

Sobre a refratariedade plaquetária de etiologia imunológica, é INCORRETO afirmar que:

Considere as afirmações abaixo sobre a ativação de linfócitos.

I - Aloenxertos estimulam respostas somente de células T, semelhante ao que ocorre na resposta imune a antígenos proteicos convencionais.

II - A resposta da célula T a um enxerto de órgão pode ser iniciada nos linfonodos que drenam o enxerto, sendo que a maior parte dos órgãos contém APC residentes, tais como células dendríticas.

III - Em torno de 1% a 2% das células T de um indivíduo são capazes de reconhecer e responder a uma única molécula do MHC estranha, e esta alta frequência de células T reativas com moléculas alogênicas do MHC é uma razão para os aloenxertos desencadearem fortes respostas imunológicas.

Quais estão corretas?

Com relação ao reconhecimento de Aloantígenos, é correto afirmar que

Numere a segunda coluna de acordo com a primeira, relacionando os reagentes às etapas de extração de DNA.

(1) Etanol.

(2) Proteinase K.

(3) Tampão TE ou água destilada estéril.

(4) DNAse.

( ) Proporciona dissolução do DNA.

( ) A inativação dessa nuclease garante uma purificação mais eficiente do DNA.

( ) Proporciona a precipitação do DNA.

( ) Proporciona desnaturação de proteínas.

A sequência numérica correta de preenchimento dos parênteses da segunda coluna, de cima para baixo, é