Prova Completa: Tecnólogo - Citometria de Fluxo (UFRJ

3023579 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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Tecnólogo - Citometria de Fluxo
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A estratégia de marcação de regiões (gating) é muito importante para a análise de subpopulações por citometria de fluxo, principalmente quando se usam múltiplas marcações. Sobre a análise de regiões, é correto afirmar que:

A

a definição de regiões permite que se avaliem, utilizando apenas um único dotplot, mais de cinco parâmetros, simultaneamente, em várias subpopulações.

B

se feita em um histograma, a marcação de região só poderá definir uma única subpopulação, uma vez que o histograma representa apenas um parâmetro.

C

não é possível separar, em um dotplot, duas subpopulações que apresentam níveis idênticos de expressão de um mesmo marcador.

D

a definição de regiões permite separar subpopulações para que se avalie a expressão de marcadores especificamente em cada uma delas.

E

em uma análise de citometria, as regiões só podem ser definidas pelo uso de anticorpos específicos para cada subpopulação de interesse.

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3023578 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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Em um experimento para avaliar a expressão de marcadores de células tratadas (A) e não tratadas (B) com um fármaco de interesse, obteve-se o resultado mostrado a seguir. Na representação, observa- -se o deslocamento de subpopulações (X, Y e Z). Em relação a esse resultado, pode-se afirmar que:

Enunciado 3461737-1

A

o fármaco diminui a expressão do marcador 1 apenas nas células que expressam o marcador 2.

B

o tratamento afeta a expressão do marcador 1 sem ter efeito sobre a expressão do marcador 2.

C

o fármaco é um inibidor da expressão do marcador 2 e um indutor da expressão do marcador 1.

D

o tratamento com o fármaco diminui a expressão do marcador 2 nas subpopulações que expressam esse marcador.

E

não é possível tirar conclusões sobre o efeito do fármaco na expressão dos marcadores nessas subpopulações apenas com esse experimento.

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3023577 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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Dentre as opções a seguir, indique a alternativa correta para explicar a falsa marcação positiva de macrófagos peritoneais incubados com anticorpo contra a molécula CD3 em um dado experimento.

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3023576 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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Com relação às considerações gerais a seguir, marque a alternativa correta.

A

As regiões de análise devem ser definidas visualmente.

B

Mesmo os anticorpos fornecidos em solução de azida sódica sempre devem ser abertos em fluxo laminar em condições estéreis.

C

Em experimentos de fagocitose de partículas fluorescentes, os citômetros de fluxo não discriminam partículas recém-internalizadas de partículas aderidas à membrana plasmática.

D

As marcações fenotípicas de células vivas são feitas no gelo para evitar que os fluorocromos se desconjuguem dos anticorpos.

E

A autofluorescência das amostras celulares afeta muito a marcação por citometria de fluxo ao serem analisados os dados.

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3023575 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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Assinale a alternativa correta sobre a análise do histograma a seguir, considerando que a região R19 abrange os eventos positivos para o marcador indicado no eixo X.

Enunciado 3461732-1

A

Apesar de ser uma marcação bimodal, uma região única deve ser usada para todas as análises.

B

O coeficiente CV é menor na população da esquerda compreendida pela região R19.

C

A intensidade de marcação da população da esquerda compreendida pela região R19 é maior.

D

Por causa do eixo Y, podemos afirmar que há um maior número de eventos na população da direita em relação à da esquerda dentro da região R19.

E

A região R19 está correta para avaliar o percentual de eventos positivos para o marcador, mas não deve ser usada para avaliar a mediana de intensidade de marcação.

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3023574 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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A faixa de comprimentos de onda que passa pelo filtro passa-banda 650/40 é de:

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3023573 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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Considerando um experimento cujo painel de marcação fenotípica é CD11a-FITC; CD25-PE; CD3- -PerCP e CD45R-APC, marque a alternativa correta.

A

A titulação de cada anticorpo é feita para garantir que não haja sobreposição dos espectros de emissão dos fluorocromos quando combinados.

B

Os controles chamados de FMO (em português, “fluorescências menos uma”) devem ser utilizados para avaliar se a taxa de aquisição em eventos por segundo está adequada.

C

A frequência de expressão da molécula CD25 é baixa e, por isso, deveria ser marcada com um anticorpo conjugado ao FITC.

D

É necessário que haja amostras com cada uma das marcações sozinhas para a compensação de sobreposição ótica.

E

Será necessária a compensação de sobreposição ótica entre as marcações com FITC e APC.

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3023572 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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A exclusão de dupletes ou grumos por citometria de fluxo se baseia em gráficos de pontos de FSC-A x FSC-H ou FSC-W x FSC-H. Com base nesta afirmativa, marque a alternativa correta.

A

A identificação de dupletes nestes gráficos se baseia no maior tempo de passagem do grumo durante a interceptação pelo laser, quando comparado com uma célula sozinha, alterando a proporcionalidade dos parâmetros FSC-A x FSC-H e também de FSC-W x FSC-H.

B

O tempo de passagem do evento ao ser interceptado pelo laser não afeta a discriminação de dupletes ou grumos.

C

O valor processado como FSC-A não aumenta quando um grumo ou duplete é interceptado pelo laser, em comparação a um evento representado por uma única célula.

D

Diferentes diâmetros de feixes de laseres não afetam a medida de FSC-H de uma população de células grandes e, por isso, este parâmetro pode ser usado nas duas possibilidades de gráficos de pontos para excluir grumos ou dupletes.

E

O parâmetro FSC-W é uma medida direta da quantidade de DNA em cada célula.

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3023571 Ano: 2018
Disciplina: Biologia
Banca: UFRJ
Orgão: UFRJ

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Marque a afirmação correta quanto às características físicas de fluorocromos.

A

O espectro de excitação de um fluorocromo tem sempre faixa de comprimentos de onda menos energéticos do que a faixa de comprimentos de onda do espectro de emissão, que é sempre mais energético.

B

O índice MFI é obtido pela razão de picos de marcação gerados por dois ou mais fluorocromos.

C

Os fluorocromos com espectros de excitação em faixas de comprimentos de onda mais energéticos é que geram marcações de maior intensidade (maior brilho relativo).

D

Os fluorocromos emitem fluorescência apenas na faixa do espectro de luz visível.

E

Deve-se levar em consideração se os fluorocromos escolhidos permitem que haja o fenômeno chamado de FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer).