Citômetros para separação de células (cell sorters) devem, idealmente, ser capazes de separar o maior número de células com a maior pureza possível, ou seja, ter sua eficiência mais próxima possível de 100%, embora, para nenhuma separação, isso seja possível de se garantir. No entanto, algumas estratégias podem ser utilizadas, durante o experimento, para que se otimize a separação. Dentre essas estratégias, podemos destacar:

Citômetros para separação de células (cell sorters) permitem a escolha, pelo usuário, de diferentes modos de separação. A escolha do modo de separação depende do que o analista pretende fazer com as células após a separação. Sobre os diferentes modos de separação, podemos afirmar que:

A análise do ciclo celular pode ser realizada de maneira bastante satisfatória por citometria de fluxo. Uma metodologia interessante é a dupla marcação de células com iodeto de propídeo (PI) e anticorpo anti-BrDU (anti-BrDU) em células que proliferaram na presença de BrDU. Essa dupla marcação, para a maioria das células em proliferação, gera um gráfico com três regiões claramente definidas, como mostrado na figura a seguir:

As regiões destacadas na figura denotam três fases do ciclo celular: a fase G0/G1, a fase S e a fase G2/M. Essas três fases estão representadas no gráfico, respectivamente, pelas regiões:

Diversas metodologias podem ser empregadas para o estudo da morte celular por citometria de fluxo. Cada uma dessas metodologias utiliza estratégias baseadas nas propriedades de células em processo de morte por apoptose ou necrose. Dentre essas metodologias podemos destacar a marcação de células com anexina-V, iodeto de propídeo, detecção de fragmentos de DNA pela técnica de TUNEL, marcadores de DNA e sondas fluorescentes que medem o potencial de membrana mitocondrial. Sobre as vantagens e desvantagens desses métodos, podemos afirmar que:

Eventos celulares como acidificação de organelas, fluxo de cálcio ou produção de radicais livres, entre outros, podem ser monitorados por ensaios de citometria de fluxo, utilizando sondas. A característica físico-química comum a todas as sondas utilizadas para essas finalidades é:

Ao realizar a titulação de um anticorpo e montar o gráfico de intensidade média de fluorescência (IMF) contra a concentração do anticorpo, um analista obteve o resultado de marcação mostrado a seguir. No gráfico, a linha com símbolos preenchidos representa a marcação das células positivas e a linha com símbolos vazados representa a marcação em células que não expressam o marcador. Sobre essa titulação, é correto afirmar que:

A titulação de anticorpos é um passo fundamental para a otimização do processo de marcação de células. Sobre o processo de titulação, é correto afirmar que:

Um experimentador fez uma série de marcações em uma amostra heterogênea de células para definir as proporções de cada uma das subpopulações. Em uma de suas análises, ele obteve o resultado representado a seguir: Sobre a análise e os resultados obtidos, podemos dizer que:

Alguns citômetros mais modernos são capazes de contar precisamente o número de células de uma amostra e retornar valores absolutos de contagem para subpopulações. No entanto, muitos aparelhos ainda operantes não possuem esse recurso, devendo o operador lançar mão de outros métodos para determinação do número absoluto de células. Sobre o método de duas plataformas (dual-platform), podemos afirmar que:

Sobre o backgating, é correto afirmar que: