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Tris.HCl (tris(hydroxymethyl)aminomethane) é uma das soluções-tampão rotineiramente usadas na técnica imuno-histoquímica.
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Tampão citrato pH 6.0 jamais pode ser utilizado na técnica imuno-histoquímica.
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A omissão do anticorpo primário, a substituição do anticorpo primário por um soro não imune, a substituição do anticorpo primário por outro anticorpo dirigido para um antígeno diverso ao que está em estudo e a inclusão da vimentina no painel representam controles importantes da reação imuno-histoquímica.
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A desparafinização não deve ser realizada no tecido que passará pela reação imuno-histoquímica.
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Deve-se iniciar a otimização de um anticorpo com base na experiência, sem levar em consideração o que o fabricante recomenda.
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Existem, no mercado, de um modo geral, vários fabricantes para um mesmo anticorpo.
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O EDTA (ethylenediamine tetra-acetic acid ) é um ácido que tem sido utilizado, com frequência, para descalcificar tecidos mineralizados que passarão por métodos imuno-histoquímicos.
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Quando se recebe um anticorpo no laboratório, que foi comprado de determinado fabricante, ele deve vir devidamente acondicionado com gelo seco ou gelo eutético.
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A reação imuno-histoquímica não pode ser automatizada.
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Sem considerar erros de pipetagem, a recomendação do fabricante para concentração de trabalho inicial de um anticorpo primário é 1:25, e, nesse caso, supondo-se que se tenha 50 lâminas, com corte tecidual médio, é preciso utilizar 2400 microlitros do diluente e 100 microlitros do anticorpo primário concentrado, ou seja, 2500 microlitros de volume final.
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