Nas últimas quatro décadas o Brasil tem vivenciado a emergência e reemergência dos quatro sorotipos do vírus causador da dengue, assim como a introdução de diferentes genótipos e linhagens. Em relação ao sorotipo 2, a partir da vigilância genômica ativa, um genótipo diferente do prevalente no país foi identificado recentemente. Sobre o novo genótipo circulante e a ferramenta molecular utilizada na vigilância genômica na ocasião, é correto afirmar que se trata do genótipo:

Sobre as tecnologias de sequenciamento de nova geração é INCORRETO afirmar que:

Nos ensaios de evolução viral experimental são utilizados sistemas in vitro e in vivo, sendo a escolha do modelo atrelada ao objetivo do estudo. Para os experimentos envolvendo o vírus causador da Zika são, respectivamente, exemplos de modelo “in vivo” e “in vitro” amplamente utilizados:

Em um ensaio de isolamento viral, uma alíquota de soro proveniente de um paciente com quadro clínico compatível com Chikungunya foi inoculada em monocamada celular em frasco de 25cm², contendo meio de cultura completo suplementado com soro fetal bovino, e mantido em incubadora por dez dias. A monocamada celular foi observada em microscópio óptico invertido diariamente, a fim de acompanhar possível efeito citopático. Ao longo do ensaio foi observado uma ampla alteração degenerativa nas células. Em relação ao resultado do ensaio NÃO é correto afirmar que:

No Brasil, a cocirculação de diferentes arbovírus reforça a necessidade do desenvolvimento de protocolos de diagnóstico molecular rápidos, específi cos, sensíveis e que permitam a detecção, sempre que possível, de mais de um arbovírus na mesma reação. Dentre os protocolos de amplificação do genoma viral, as técnicas em tempo real apresentam vantagens neste contexto, principalmente quando utilizam sondas marcadas com fluoróforos. Sobre a técnica supracitada, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas a seguir:

I. As sondas são marcadas com uma molécula que emite fluorescência (quencher) numa extremidade e com uma molécula que absorve a fluorescência (reporter) na outra extremidade.

II. Em um protocolo para alvos múltiplos (multiplex) numa mesma reação, as sondas específi cas para cada sequência genômica poderão ser marcadas com a mesma molécula repórter, necessitando somente de moléculas quencher distintas.

III. Durante o desenho dos oligonucleotídeos, a região de hibridização da sonda deve estar localizada à montante da região de hibridização do primer sense (forward).

As afirmativas I, II e III são, respectivamente:

Durante o desenvolvimento de um ensaio de RT-PCR em tempo real e RT-LAMP, é imprescindível entender o princípio das técnicas para a escolha da DNA polimerase adequada. Assim, é correto afirmar que:

As publicações científicas sobre a técnica de amplificação isotérmica mediada por loop aumentaram durante o período da pandemia por COVID-19. Um dos motivos foi a aplicação da estratégia como alternativa para a amplificação do ácido nucleico do SARS-CoV-2. Sobre a técnica é correto afirmar que:

Durante o desenvolvimento de um protocolo de PCR, o desenho dos oligonucleotídeos iniciadores (primers) é uma etapa crucial para o sucesso do mesmo. Por isso, alguns critérios devem ser considerados. Sobre os critérios, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas a seguir:

I. A porcentagem recomendada do conteúdo GC é de 40% a 60%.
II. A terminação 3’ deve ser rica em AT.
III. Repetições de bases invertidas ou sequências auto complementares são recomendadas.

As afirmativas I, II e III são, respectivamente:

Protocolos genéricos para a detecção dos genomas dos alphavírus e flavivírus seriam recomendados para amostras suspeitas, respectivamente, de:

Um paciente internado com sintomas compatíveis para febre amarela há três dias, teve uma amostra de sangue coletada e encaminhada para o setor de diagnóstico laboratorial. Das opções abaixo, aquela que descreve, respectivamente, o “exame” e “material utilizado” mais apropriado e capaz de gerar resultado com maior rapidez é: