No sistema EnVision, inicialmente, o tecido é incubado com o anticorpo primário, seguido pelo conjugado polimérico.

Quanto mais enzimas HRP (horseradish) no polímero, mais cromógeno diaminobenzidina (DAB) é ativado, resultando em uma imunomarcação mais sensível e mais visível.

Nos sistemas poliméricos de imunomarcação, o bloqueio da biotina é necessário.

Os controles de reações imuno-histoquímica podem ser internos e/ou externos.

A parafina utilizada no processamento tecidual não deve exceder 60°C.

Deve-se incluir controles positivos e negativos em cada reação imuno-histoquímica.

De um modo geral, a imunomarcação é somente de intensidade forte a muito forte.

A preparação tecidual consiste, sequencialmente, em fixação, desidratação e inclusão em parafina.

Os fixadores coagulantes, como o álcool, e aqueles de ligação cruzada, como o formaldeído, podem causar alterações na configuração de proteínas, mascarando os determinantes antigênicos e, consequentemente, afetando a ligação do anticorpo.

O pH e a composição química das soluções usadas para recuperação antigênica não são importantes na reação imuno-histoquímica.