A técnica de PCR chega a produzir 250 milhões de cópias de determinada região de uma molécula de DNA, o que pode equivaler a multiplicar alguns nanogramas, ou menos, de DNA em microgramas. Sobre esse assunto, analise os seguintes passos:

I Fragmentação de células ou tecidos em solução tampão, seguida de realização de eletroforese em gel de poliacrilamida para separar fragmentos de DNA entre 10 e 1500 pb de comprimento, para iniciar a PCR.

II Separação do DNA alvo durante a fragmentação do DNA celular feita por enzimas termoestáveis, como a transcriptase reversa, a exonucleases e a endonucleases. Para a extração do DNA, essas enzimas são expostas a temperaturas que variam de 50 a 90º C, durante mais de 30 ciclos de repetição de reações.

III Para iniciar a PCR, em torno de 50mg de DNA alvo devem ser misturados com tampão de corrida, Taq DNA Polimerase, um par de primers feito de oligonucleotídeos e um suplemento de nucleotídeos.

IV Os primers são importantes para iniciar as reações de síntese de DNA, as quais serão realizadas pela Taq polimerase. Ambos devem se ligar às duas fitas do DNA para amplificação adequada.

V A reação entre as moléculas do item IV (primers e Taq polimerase) deve ocorrer em temperatura média de 50 a 60° C, quando as pontes de hidrogênio entre os nu cleotídeos são quebradas, separando a dupla hélice, para que ambas as fitas sejam copiadas repetidas vezes.

Entre esses passos, estão corretos os descritos nos itens

Relacione os insumos e demais materiais de laboratório, à esquerda, com as técnicas e os aparelhos, à direita.

I Brometo de Etídio, Fluoresceína
II Marcadores de Peso molecular, nucleotídeos
III Membrana de nitrocelulose, câmara de contagem
IV Fitas indicadoras de esterilização, cestos de inox
V Eletrodos de condutividade, dodecilssulfato de sódio

( ) Eletroforese

( ) PCR

( ) Autoclave

( ) Cultivo celular

( ) Transiluminador

A sequência correta, de cima para baixo, é:

Sobre fundamentos e finalidades de alguns equipamentos laboratoriais, é correto afirmar:

Observe os procedimentos listados a seguir:

- Ligar a cabine e a luz UV de 15 a 20 minutos antes de seu uso.

- Descontaminar a superfície interior com gaze estéril embebida em álcool etílico ou isopropílico a 70%.

- Usar jaleco de manga longa, luvas, máscara, meios, vidraria, pipetador automático, recipientes para descarte de material no fundo da área de trabalho ou lateralmente.

- Efetuar movimentos precisos e delicados na área de trabalho.

- Usar de forma prolongada lâmpadas UV para esterilização.

Esses são procedimentos operacionais padrão para o desenvolvimento da técnica de

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