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A purificação de uma proteína de um extrato celular resultou na obtenção de um aumento da atividade específica em 10 vezes. Todo o processo foi realizado em pH 7,0.
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Etapa |
Proteína total (mg) | Atividade total (U) | Atividade específica (U/mg) | Recuperação (%) |
Nível de Purificação |
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Extrato celular |
31,4 | 290 | 9,2 | 100 | 1 |
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DEAE Sepharose |
14,1 | 250 | 17,7 | 86 | 1,9 |
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Gel-filtração |
5,8 | 120 | 20,7 | 41 | 2,3 |
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Coluna ligada à benzamidina |
0,7 | 69 | 98,5 | 24 | 11 |
Considerando que: 1- a proteína está incluída numa coluna de troca aniônica, que é eluída com alta concentração de sal; 2- que na gel filtração (com resina que separa proteínas entre 20 e 70 kDa) é eluída imediatamente após ao v0 da coluna e, 3- que a última etapa é uma coluna de afinidade, pode-se afirmar que a proteína:
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A caracterização de proteínas e de misturas proteicas ganhou impulso a partir dos anos 90 com o estabelecimento de novas metodologias de ionização de peptídeos e proteínas, especialmente a ionização por MALDI (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization) e ESI (Electrospray Ionization). A análise do proteoma de células, tecidos e órgãos também se tornou possível através das técnicas de proteômica. Uma das enzimas mais utilizadas para obtenção de peptídeos é a tripsina. Sobre as vantagens do uso desta enzima para as análises por espectrômetros de massas, pode-se afirmar que a tripsina:
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A caracterização de proteínas e a determinação da sequência dos resíduos de aminoácidos ganhou grande impulso com o desenvolvimento da técnica de degradação de Edman, e especialmente com sua automação. Sobre esta metodologia, é INCORRETO afirmar que:
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Em uma análise típica usando a técnica de western blot com extrato de músculo esquelético, um pesquisador obteve o seguinte resultado, utilizando anticorpos primários antienzima AKT, anti AKT fosforilada, anti-GLUT 4 e anti-Actina:

Pode-se afirmar que os anticorpos foram utilizados para:
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Para analisar a pureza e as características de um concentrado proteico purificado, um pesquisador utilizou três técnicas diferentes, eletroforese em poliacrilamida na presença de dodecil sulfato de sódio, cromatografia de gel filtração e espectrometria de massas (MALDI-TOF). Os resultados obtidos estão na tabela a seguir:
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Análise |
Resultado |
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SDS PAGE |
uma banda de 25 kDa |
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SDS PAGE com redutor |
duas bandas, uma com 12 e outra com 13 kDa |
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Cromatrografia de Gel filtração |
um pico de 50 kDa |
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Espectrometria de Massas (MALDI-TOF) |
um pico de 24.973,54 Da |
A partir da análise, pode-se inferir que a purificação resultou em:
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As membranas biológicas constituem barreiras entre o meio ambiente e a célula, ou no interior da célula definem compartimentos chamados de organelas. Elas são importantes na permeabilidade seletiva, na criação de gradientes etc. Entre as propriedades conhecidas para as membranas, assinale a alternativa INCORRETA.
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Sobre as enzimas proteolíticas do tipo quimotripsina, pode-se afirmar que o mecanismo de ação se dá:
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A sequência do RNAm do gene que codifica uma proteína contém os seguintes nucleotídeos: AUGCCCGGUUCA. Considerando que as sequências estão escritas de acordo com a convenção 5’-3’, assinale a alternativa que corresponde à sequência do gene.
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O deslocamento químico se origina de:
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Assinale a alternativa que apresenta o melhor critério para medir a qualidade da estrutura de uma proteína obtida por cristalografia e difração de raios X.
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