A prática de cultura de células deve obedecer a rigorosos controles para assegurar a qualidade dos resultados, seja em escala experimental ou em escala industrial. A contaminação de culturas de células é um dos principais problemas e, certamente, o mais frequente na rotina de cultivo. Sobre contaminação das culturas, é correto afirmar que:

A anestesia inalatória pode ser utilizada apenas para a contenção do animal, mas em geral é utilizada para procedimentos cirúrgicos mais ou menos invasivos. Portanto, o analista que lida com animais de laboratório deve conhecer as bases do manejo anestésico nesses animais. Sobre o manejo anestésico de camundongos, é correto afirmar que:

A DBCA também dispõe sobre a prática de eutanásia. Sobre a prática de eutanásia em camundongos, pode-se afirmar que:

Vários genes-repórteres são bem caracterizados, como o gene que codifica a luciferase ou a proteína verde fluorescente (GFP), sendo amplamente utilizados em diversos ensaios biológicos. Assinale a alternativa que NÃO contém uma característica desejável para um gene-repórter ideal.

O uso de imageamento de animais e bioluminescência tem aplicações muito variadas. Uma das principais aplicações é o monitoramento do desenvolvimento de tumores. É importante que o operador tenha conhecimento sobre o disposto pela DBCA quanto a experimentos envolvendo a indução de tumores. Sobre essas disposições, é correto afirmar que:

Durante um experimento, o pesquisador verificou – no meio do procedimento – que um dos animais apresentava sinais de distresse e dor, aparentemente decorrente do procedimento experimental. Neste caso, para uma atitude condizente com o recomendado na Diretriz Brasileira para o Cuidado e a Utilização de Animais em Atividades de Ensino ou de Pesquisa Científica (DBCA), o pesquisador deve:

Citômetros para separação de células (cell sorters) devem, idealmente, ser capazes de separar o maior número de células com a maior pureza possível, ou seja, ter sua eficiência mais próxima possível de 100%, embora, para nenhuma separação, isso seja possível de se garantir. No entanto, algumas estratégias podem ser utilizadas, durante o experimento, para que se otimize a separação. Dentre essas estratégias, podemos destacar:

Citômetros para separação de células (cell sorters) permitem a escolha, pelo usuário, de diferentes modos de separação. A escolha do modo de separação depende do que o analista pretende fazer com as células após a separação. Sobre os diferentes modos de separação, podemos afirmar que:

A análise do ciclo celular pode ser realizada de maneira bastante satisfatória por citometria de fluxo. Uma metodologia interessante é a dupla marcação de células com iodeto de propídeo (PI) e anticorpo anti-BrDU (anti-BrDU) em células que proliferaram na presença de BrDU. Essa dupla marcação, para a maioria das células em proliferação, gera um gráfico com três regiões claramente definidas, como mostrado na figura a seguir:

As regiões destacadas na figura denotam três fases do ciclo celular: a fase G0/G1, a fase S e a fase G2/M. Essas três fases estão representadas no gráfico, respectivamente, pelas regiões:

Diversas metodologias podem ser empregadas para o estudo da morte celular por citometria de fluxo. Cada uma dessas metodologias utiliza estratégias baseadas nas propriedades de células em processo de morte por apoptose ou necrose. Dentre essas metodologias podemos destacar a marcação de células com anexina-V, iodeto de propídeo, detecção de fragmentos de DNA pela técnica de TUNEL, marcadores de DNA e sondas fluorescentes que medem o potencial de membrana mitocondrial. Sobre as vantagens e desvantagens desses métodos, podemos afirmar que: