MicroRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs de fita simples, não codificantes, com aproximadamente 22 nucleotídeos de extensão, que atuam na regulação da expressão gênica. Essas moléculas desempenham importante papel no câncer. miRNAs tecido-específicos podem atuar como potenciais biomarcadores no diagnóstico, na predição de resposta ao tratamento e na definição de prognóstico. Diferentes abordagens metodológicas podem ser utilizadas para a análise da expressão de miRNAs.

Dentre essas técnicas utilizadas, qual delas permite que novos miRNAs sejam descobertos?

Assinale com V (verdadeiro) ou F (falso) as afirmações abaixo que envolvem a análise de dados obtidos de sequenciamento de nova geração.

( ) A etapa que envolve a tradução do sinal obtido durante o sequenciamento em uma sequência de bases é conhecida como anotação de variantes. O arquivo gerado é o FASTQ.

( ) Os milhares de fragmentos de DNA sequenciados serão comparados a um genoma de referência na etapa de alinhamento de sequência.

( ) O arquivo com formato BAM de uma amostra corresponde ao arquivo comprimido gerado após o alinhamento de sequência a um genoma de referência.

( ) A etapa conhecida como "chamada" de variantes (variant calling) é utilizada para distinguir variantes verdadeiras de artefatos de sequenciamento, objetivando a identificação das variantes patogênicas e com significado clínico.

A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é

Numere a segunda coluna de acordo com a primeira, associando as etapas envolvidas no sequenciamento de nova geração às suas respectivas descrições.

(1) Preparo da biblioteca de DNA

(2) Sequenciamento

(3) Análise dos dados

( ) Chamada de bases, alinhamento de sequências, identificação e anotação de variantes.

( ) Imobilização de cada fragmento de DNA em uma fase sólida, amplificação clonal e hibridização do primer à extremidade contendo a sequência adaptadora.

( ) Envolve PCR multiplex com primers-alvo específicos, fragmentação mecânica ou enzimática e adição de adaptadores nas extremidades.

( ) Amplificação clonal para aumentar o sinal de detecção.

A sequência numérica correta de preenchimento dos parênteses da segunda coluna, de cima para baixo, é

Considere as afirmações sobre sequenciamento de nova geração (NGS – Next-Generation Sequencing).

I - Permite a identificação de mutações germinativas e somáticas.

II - DNA circulante livre de células (cfDNA – cell-free DNA) e DNA circulante livre de células derivado do tumor (ctDNA – tumor-derived cell-free DNA) podem ser analisados por NGS.

III - A plataforma Ion Torrent (tecnologia de semicondutor) baseia-se no sequenciamento por síntese com detecção de fluorescência.

IV - É uma técnica de alto rendimento que permite a análise simultânea de inúmeras amostras.

Quais estão corretas?

O sequenciamento pelo método de Sanger permite determinar a sequência de nucleotídeos de um fragmento de ácido nucleico e consiste na separação, por tamanho, de subconjuntos de moléculas de DNA.

As alternativas abaixo apresentam componentes essenciais para realização desse método, EXCETO:

No Brasil, é obrigatória a realização de triagem sorológica laboratorial para o candidato à doação de células para transplante alogênico (aparentado e não aparentado), conforme estabelecido na RDC nº 214/2018.

Assinale a alternativa que contém doenças transmissíveis obrigatoriamente testadas em conformidade à referida legislação.

A doação de CPH para transplante, após confirmação da compatibilidade entre doador e receptor, precisa da concordância do doador e deve ser formalizada através da aplicação e assinatura do documento denominado Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE).

Considere as informações abaixo sobre os itens que devem constar no termo, de acordo com a RDC nº 214/2018, da ANVISA, e assinale-as com V (verdadeiro) ou F (falso).

( ) Informações sobre os riscos ao doador e sobre o propósito ou uso das células que serão coletadas.

( ) Informações sobre os testes laboratoriais que serão realizados para a qualificação de doador.

( ) Autorização para acesso a dados clínicos e história médica do doador, para obtenção de informações com importância potencial para o procedimento de uso terapêutico ou pesquisa clínica.

( ) Informações sobre a impossibilidade de negar ou desistir da doação nas diversas fases do processo.

A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é

A Sala de criopreservação e/ou armazenamento do Centro de Processamento Celular que possuir sistema de armazenamento de células em tanques de nitrogênio líquido, ou sistema de segurança de abastecimento de nitrogênio para congelador mecânico, deve ter condições especiais.

Considere as descrições abaixo, assinalando aquela que NÃO contempla essas condições, de acordo com a RDC nº 214/2018, da ANVISA.

O transplante de células progenitoras hematopoéticas _________ predispõe a um menor tempo de neutropenia e plaquetopenia pós-transplante, com a desvantagem de maior incidência de _________. As células provenientes de _________ apresentam _________ exigência na compatibilidade HLA entre doador e receptor.

Assinale a alternativa que completa, correta e respectivamente, as lacunas da sentença acima.

Com relação ao transplante de CPH, assinale as afirmativas abaixo com V (verdadeiro) ou F (falso).

( ) O transplante de células progenitoras hematopoéticas é utilizado no tratamento de doenças malignas, como leucemias, podendo, também, ser indicado para outras patologias, como anemias e doenças autoimunes.

( ) Na seleção de doadores para transplante alogênico são considerados diversos fatores relacionados ao doador, tais como: idade, sexo, imunizações prévias do doador e sorologia para CMV, sendo preferíveis doadores do sexo feminino.

( ) A triagem sorológica de doadores alogênicos deve ter resultados de, no máximo, 15 dias antes do transplante.

( ) A falha de enxertia é uma complicação que deve ser monitorada em pacientes que recebem transplantes. Pode estar relacionada ao número insuficiente de células progenitoras infundidas, à depleção de células T e ao grau de incompatibilidade HLA entre doador e receptor.

( ) Técnicas especiais de preparação do enxerto para transplante incluem depleção de células T, seleção de células CD34+ e purificação celular em filtros de leucorredução.

A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é